分光光度計在更換、重新安裝、運輸或檢修光源燈后，以及當(dāng)機器不能正常工作時，都應(yīng)進(jìn)行波長校準(zhǔn)。對于正常運行的機器，還應(yīng)每月檢測一次波長，必要時進(jìn)行校準(zhǔn)，以確保波長讀數(shù)與通過樣品的波長一致，并確保機器的第一靈敏度。通常使用光譜釹濾光片校準(zhǔn)方法，適用于721型儀器可見光區(qū)域的波長校準(zhǔn)。通常以585nm或529nm或T%處的吸收峰為標(biāo)準(zhǔn)。由于721型機器的出射光波長較寬，因此不容易分離573nm和585nm處的兩個峰值或波谷，校準(zhǔn)過程中可能會出現(xiàn)誤差。因此，建議使用529nm處的峰或谷作為波長校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)。

分光光度計波長校準(zhǔn)方法

校準(zhǔn)期間，機器根據(jù)需要預(yù)熱。要求電源電壓穩(wěn)定。波長被卷繞在580nm，T%被調(diào)節(jié)到頂部。在反應(yīng)杯處放置一條白紙，檢查邊緣是否有光強均勻且無光暈或雜散光的斑點。如果不符合要求，調(diào)整燈泡位置使其符合要求，這是對波長校準(zhǔn)的粗略調(diào)整。然后將靈敏度調(diào)整至1（最低檔位），將波長刻度盤對準(zhǔn)529nm，并將儀器的機械零點調(diào)零。

當(dāng)光路為空白時，將T%調(diào)整為100%T，并重復(fù)檢查零點和100%T穩(wěn)定性信息。將光譜Nd濾光器插入光路中，逐漸旋轉(zhuǎn)波長盤以找到透光率最低的一個（當(dāng)微旋轉(zhuǎn)波長盤向左和向右旋轉(zhuǎn)時，透光率值增加），即波長為529nm。確定波長盤的指示值是否為529nm。如果指示值為534nm，則波長誤差為5nm。

如果超過規(guī)定值（±1nm），則必須進(jìn)行調(diào)整。調(diào)整方法：將波長盤對準(zhǔn)529nm，從光路中取出光譜釹濾光片，當(dāng)光路為空白時，將儀器指針調(diào)整至100%T，然后將光譜釹濾光片插入光路。打開機器左側(cè)的小蓋板，找到波長校準(zhǔn)螺釘（左手柄長度的螺釘）；沿逆時針方向進(jìn)行微調(diào)（如果存在負(fù)誤差，則為順時針方向），使儀表指針的指示器T%最低。重復(fù)測量波長誤差信息，直到其符合機器的技術(shù)規(guī)范。裝上左側(cè)的小蓋板，校準(zhǔn)完成。